石蜡切片做**荧光，分享

石蜡切片做**荧光，分享

1，烤片，在恒温箱中58摄氏度20分钟。

2，脱蜡和水化。

三桶二甲苯，分别浸泡15分钟。

100，95，85，70四桶酒精，分别浸泡5分钟。

然后在水龙头下，流水冲洗10min。

3，修复，我是用的柠檬酸缓冲液ph6的，高压修复，高压锅喷气后3分钟。然后取出来自然降温（我是浸泡在冷水中）。用PBS洗10min，三次。

4，甩干液体，用**组化笔画圈。

5，0.2%的Triton破膜（我染的核蛋白），15min。

6，3%双氧水阻断，30min，然后PBS洗10min，三次。

7，5%BSA封闭1小时。

8，甩干液体，用1%BSA配一抗。室温30min。然后4度冰箱过夜。

9，**天取出，室温30min，PBS洗15min，三次。

10，甩干液体，避光加稀释的二抗，孵育1小时，避光PBS洗15min，三次。

11，用DAPI染核，PBS洗。

12，加防粹灭剂，封片。

在荧光显微镜下看。