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ELISA试剂盒选择的几条准则

日期:2022-07-14 06:40
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摘要:ELISA试剂盒选择的几条准则

ELISA试剂盒选择的几条准则

一、依据试验物种及待检样品性质来挑选ELISA
假如试验君的试验样品为人、小鼠或大鼠样品,那么要挑选一个适宜的试剂盒相对容易,但假如您的试验样品来历于其他物种如鸡、牛、猴等,则市面上能供给的试剂盒品种却很少。且不行轻信能供给近万种试剂盒,覆盖多物种的供货商。但假如又非要检测这些物种的目标时,要对待检物(如有种属差异性)进行同源性剖析以及试剂盒的种属穿插反响数据。关于样品类型而言,一般的商业化试剂盒都经过血清、血浆和细胞培养上清液的验证。在挑选试剂盒时,要具体阅览说明书,比方血浆样本抗凝剂的运用是否与试剂盒兼容。别的,在某些情形下样品中会存在搅扰要素比方溶血血浆、高脂肪含量的样品、人抗鼠抗体(HAMA)、细胞培养上清中含胎牛血清等。因而需依据样品来挑选试剂盒,必要时还要依据样正本恰当优化。或在样品搜集前,先阅览一些牢靠供货商试剂盒的说明书或直接咨询。假如您的样品为安排或细胞裂解物,则需求更慎重的挑选试剂盒。市面上大多数的商业化试剂盒没有经过多种来历安排样本的验证。这需求试验君能了解不是所有试剂盒所用的抗体对,都能特异的从一堆裂解物蛋白中特异检出您的意图蛋白,还要考虑安排样品的基质效应(Matrix Effect)等。但假如试验君要了解安排样品的制备问题,我们另起一文来总结。
二、详尽比较试剂盒关键性技术参数
ELISA试剂盒的关键技术参数包含板内差异性、板间差异性、批间差异性、重复性、特异性及穿插反响性、回收率等。假如试验君常常开展ELISA试验,主张运用同一厂家的试剂盒,这样可尽量保证数据的重复性(当然条件是试验条件的一致性)。关于科研用的定量ELISA试剂盒,不同的生产厂家运用的抗体对、酶以及底物、生产工艺和研制实力不尽相同,天然不同厂家试剂盒测出的数据会有差异。
三、依据样品中检测物水平来挑选试剂盒
假如试验君关于样品中待检物的水平没有任何可参阅的数据,挑选宽动力学检测规模的试剂盒。假如样品中待检物的含量很低,主张挑选高灵敏度的试剂盒。为了下降基质效应,有必要用稀释液至少做2倍稀释。假如样品中待检物含量远超过试剂盒的检测规模(标曲规模), 也需做恰当的倍数稀释。在计算结果时,需乘以相应的稀释倍数。
四、供货商资质评价
纵观国内外ELISA试剂盒供货商,“柏君”估计至少100余家。有些供货商可供给数百种常用目标ELISA,然而有些供货商则声称可供给数千种乃至上万种目标的试剂盒,但质量参差不齐,更有滥竽充数祸患科研之辈。那假如挑选供货商呢?
1、从同行或试验室同僚了解供货商的口碑,售前售后的处理状况。
2、查询供货商的网站具体了解相关目标,可查询这些目标是否现已开宣布特异性抗体?假如查遍全球连抗体都还不行获取,又怎么开宣布ELISA试剂盒呢? 第3、文献引证是王道,尤其是SCI期刊文章对供货商产品的引证。
4、了解供货商的研制前史和品牌史,许多供货商一再替换公司名或替换公司注册地,其间名堂试验君应该能悟出。不要迷信国外“品牌”,国外“品牌”不代表是世界知名品牌。许多打着国外旗帜的公司,其实就是空壳的皮包公司,从全球OEM残次产品。国外供货商也有售后不给力的时分。
五、依据样本可获得性来挑选试剂盒
一般而言,商业化试剂盒的样品用量都在50ul或100ul, 但也有一些供货商的试剂盒对样品的用量要求可少至10ul。假如您的样品很宝贵或较难获取,则需求仔细考虑试剂盒对样品用量的要求。假如样品量少,且要做多因子检测时更需慎重。
六、经费预算
说了半天,仍是要看课题经费的预算。没经费咋搞科研呢?世界公认的知名品牌一般质量牢靠,文献引证多。但世界品牌由于进口和世界运送等本钱较高,因而售价也较高。其实上等国产品牌也是不错的挑选, 因省去不少物流和报关费用,与国外进口试剂盒比较价格上有比较大的优惠,并且能供给比较灵敏的包装标准, 如48tests小包装,十分合适我国国情。国内ELISA品牌靠谱的仍是有4到5家,这儿就不做硬广告了,试验君能够上丁香通、小木虫等行业资讯途径或论坛等了解。当然您能够随时联络“柏君”为您排忧解难。
七、认清订货途径
不论是世界仍是国内品牌,都需求在订货前先与生产厂商具体沟通产品细节(比方酶标板是否可拆卸),了解售前售后技术服务才能等。然后咨询其官方订货途径,比方直接向厂家订货或经过我国区或省级授权代理商经销商订货。谨防假冒产品,花了钱是小事,试验数据的牢靠性、真实性是大事呀,耽误了时间延迟了结业更是不无处抱怨! 空留悲伤泪。挑选正规途径,挑选上等质量!

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