冰冻切片组织取材的问题

冰冻切片组织取材的问题

我的组织处理方法如下：

1）取出内脏后，去离子水漂洗3次左右，洗去表面的血，然后擦干。

2）OTC包埋。

3）放进-80°C冰箱直接速冻。

然后想询问下各位战友一些问题：

1.取出内脏后，为了避免更多冰晶的产生，能否不漂洗，直接擦干血迹然后包埋？这样做会不会有很多红细胞附着在组织切片上面？

2.直接进行-80°C速冻，速冻时长和冰晶产生的多少有关联吗？

3.肝、肾组织切片能直接速冻就切吗（主要是老板说他当年切的时候，直接速冻就切出来了，我试过脱水、速冻等办法都没出到能用的图，被骂得很惨。。。）

灌注固定了吗？如果没有事前固定，那后期取材动作要快，取材后马上先固定下再脱水（没有及时固定的话抗原会降解），肝肾组织含水量比较大，容易有冰晶产生，脱水完成后OCT包埋（OCT完全变白后马上终止液氮速冻）