人抗Ku抗体检测试剂盒即酶联**吸附试验的通用步骤
捕获抗体、标准品和检测抗体均为冻干粉,使用前应保存于-20℃,捕获抗体、标准品和检测抗体重悬后,在4℃时*长保存2周。如果您已重悬了EDK的各组份,并准备在2周之后使用,请将重悬的组分分装并冻存于-20℃,*长可保存6个月。
人抗Ku抗体ELISA试剂盒,英文名称:Human anti- Ku antibody (anti-Ku-Ab) ELISA Kit
货期:现货,主要用途:科研检测,用于定量测定。测定的对象可以是抗体也可以是抗原。
与EDK的其它三个组分不同,Avidin-HRP为即用型
目的是避免反复冻融或长期4℃保存对该组分的功能损害。收到Avidin-HRP后,立即将其分装为6ul/管,共10管,冻存于-20℃,*长可保存2年
人抗Ku抗体检测试剂盒第1阶段:
捕获抗体包板,将捕获抗体稍作离心,使抗体集中于管底,用无菌水将捕获抗体重悬至说明书上要求的浓度,静置10分钟以使抗体完全溶解,重悬的抗体以*高速度离心3分钟,用1xPBS稀释捕获抗体至说明书上要求的浓度,轻轻颠倒或振荡混匀,一定不要产生气泡。
立即在每个ELISA板孔中加入100uL捕获抗体,将封板膜用力压盖在ELISA板上,注意不要使抗体滴溅在封板膜上,25℃孵育过夜,或者37℃孵育2-4个小时,洗板时需将液体倒掉,并在干净的吸水纸上拍干,每孔加入300ul洗液,然后再将液体吸除,该步骤再重复3次,总共洗涤4次,*后一次洗涤后,将板倒置以去除液体,并在干净的吸水纸上拍干,ELISA板还有其它几种洗涤方法。无论使用哪种方法,请在整个ELISA实验过程中保持一致。
人抗Ku抗体检测试剂盒**阶段:封闭非特异性结合
牛血清白蛋白作为封闭试剂,可封闭塑料孔内任何未结合蛋白的位点,每孔中加入300ul封闭液,封板,并在25℃孵育至少1小时。
第3阶段:抗原的特异性结合,在上一孵育过程结束前,将标准品稍作离心,并用无菌水重悬至要求的浓度,静置至少10分钟,以使标准品完全溶解,重悬结束后,取出板并洗涤4次,重悬的标准品以*高速度离心3分钟,稀释到所需浓度,轻轻颠倒或振荡混匀,标准曲线在ELISA板上的区域专用于检测已知浓度的蛋白标准品,如果使用多道移液器,除**列外的所有标准曲线孔中均加入100ul稀释液,然后,人抗Ku抗体检测试剂盒在标准曲线孔的**列中加入200ul标准品溶液,依次倍比稀释,标准品至少有6个浓度,每个标准曲线孔中液体的终体积应为100ul,标准品至少有6个浓度,每个浓度为3个复孔,再设6个空白孔,其中仅含稀释液,空白孔是必须的,它们将用来评价试剂盒检测样本的效能,然后,在剩余孔中加入待测样本,每个样本设3个复孔,样本中若待检抗原的浓度过高,要得到*佳结果可能需对样本进行稀释,封板,25℃孵育2小时。
人抗Ku抗体检测试剂盒第4阶段:加入生物素标记的检测抗体以形成夹心,孵育结束前,稍离心检测抗体,并用无菌水重悬,静置10分钟,孵育结束后,取出板,洗涤4次,*高速度离心3分钟。
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